酶标仪常用功能

酶标仪，是生命科学研究实验室的重要工具，也被称为微孔板检测仪。

传统的酶标仪是指具备吸收光检测功能的酶联免疫检测仪，后来随着技术的发展，在吸收光检测基础上增加了荧光和发光检测，因此，我们把具有两种及两种以上检测功能的酶标仪称为多功能酶标仪，目前广泛应用于临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学研究中。

多功能酶标仪通常包括紫外-可见吸收光、荧光强度及发光三种检测模式，荧光检测还包括高级荧光应用。因此一台全面的多功能酶标仪能够提供的检测模式可以包括：

1. 吸收光检测（Absorbance）：

在特定波长下检测被测物的吸光值，称为光吸收检测（Absorbance，Abs）。光源发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔板中的待测标本，该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器，特定波长下，同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系，符合朗伯比尔定律。

典型应用：ELISA 以及 DNA/RNA 纯度检测。

2. 荧光强度（Fluorescence Intensity，FI）：

一些原子和分子吸收特定波长的光，随后短暂发射更长波长的光的特性。利用一个外部光源，在特定波长下激发样品，荧光基团受到适当波长的激发，分子从基态转化成激发态。随着分子回到基态，能量会以热（损失能量）和能量更低、波长更长的光的形式释放。

典型应用：荧光免疫分析、荧光蛋白的报告基因分析

3. 发光检测（Luminescence，Lum）：

发光检测包括化学发光(Chemiluminescence)和生物发光(Bioluminescence)，是样本孔内发生的化学、生化或者酶反应发出的光信号，与光吸收和荧光检测不同的是，发光检测不需要激发光源，这就使得检测更敏感，更不易引起背景噪音。

典型应用：ATP 检测和双报告基因检测

4. 荧光共振能量转移（Fluorescence Resonance Energy Transfer，FRET）

使用两种荧光分子分别作为供体和受体去标记两个生物分子，如果两个生物分子足够接近，那么供体荧光分子的激发能诱发受体荧光分子发出荧光信号。FRET 通常用来检测生物大分子相互作用。值得注意的是，选用的供体荧光分子发射光波长范围需要与受体荧光分子的激发光波长重叠。

5. 生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET）：

生物发光能量共振转移检测原理与FRET类似，不同的是供体产生生物发光来激发受体荧光分子，无需激发光，背景更低，也避免了光漂白和自发荧光等问题。

6. 时间分辨荧光（Time-resolved fluorescence ，TRF）：

时间分辨荧光是一种高级荧光检测技术，使用镧系金属做荧光标记(其荧光比普通荧光持续时间更长，普通荧光的半衰期为纳秒级，镧系元素的半衰期是毫秒级)，利用荧光分子之间荧光寿命的差异来分离所需的荧光信号。

7. 荧光偏振（Fluorescence polarization，FP）：

当溶液中的荧光分子受到偏振光激发时，如果分子（对于荧光素约持续4纳秒）保持静止，发射光将位于同样的偏振平面。如果在受激发时，分子旋转或翻转偏离这一平面，发射光将位于与激发光不同的偏振面。FP用于检测通过竞争性结合来检测大分子和小分子相互作用。

8. 均相时间分辨荧光（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence, HTRF）：基于TRF技术衍生出的新技术，将TRF技术和FRET技术相结合，能量供体选择镧系元素铕(Eu)和铽(Tb)的穴状化合物，交联别藻蓝蛋白(cross-linked APC)或小分子荧光探针d2作为受体，当供体和受体距离足够近时，供体被一个能量源激发，可以引发能量转移到受体，使其在特定波长发出荧光，用于检测生物分子之间的相互作用。

多功能酶标仪的技术革新

多功能酶标仪的研发历史上出现过很多次技术革新，而将酶标仪的灵活检测与细胞成像的表型分析相结合，绝对是近年来微孔板检测技术开发中创新与实用的代表！使每一个实验室都能在一台仪器上实现细胞的多维度分析成为可能！安捷伦 BioTek 以应用为导向，率先在多功能酶标仪中加入了细胞成像功能，开发 Cytation 系列细胞成像多功能微孔板检测系统，创新性的将传统的微孔板检测与高通量全自动数字显微成像相结合，支持各种生物化学和成像应用的自动化工作流程，并为用户提供了将标准微孔板检测输出数据与通过成像收集的表型细胞信息进行相互验证的能力。

Cytation 延续了 BioTek 多功能微孔板检测仪的出色性能，而成像功能更是开辟了多个应用领域，实现了无法在标准微孔板检测仪上进行的细胞学试验，将成像数据与检测输出数据相结合，可以使研究人员将其细胞代谢、基因表达、信号通路、离子通道和其他研究提升到一个新的水平。

声明：仅供研究使用，不用于诊断性操作。

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